BL21 Chemically Competent Cell感受態細胞

簡要描述：BL21 Chemically Competent Cell感受態細胞保存條件：-80℃ 基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS) BL21 Chemically Competent Cell感受態細胞

產品型號：ABG200-50
產品品牌：Abnbio
更新時間：2024-03-25
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詳細介紹

品牌	Abnbio	貨號	ABG200-50
規格	50X100ul	供貨周期	現貨
主要用途	感受態細胞	應用領域	環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥

基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS)

簡要說明BL21是最早開發的用于原核表達的菌株，BL21（DE3）、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達菌株均來源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達，不含T7RNA聚合酶，所以不能用于由T7啟動子驅動的蛋白表達(如：pET系列)；但含有大腸桿菌RNA聚合酶，可以用于tac或trc等使用大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統的表達（如：pGEX，pMAL質粒）。 BL21感受態細胞由特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率達107cfu/μg。

操作說明

1.取100μl冰上融化的BL21感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養基，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

注意事項

感受態細胞最好在冰上融化。
混入質粒時應輕柔操作。
轉化高濃度的質粒可相應減少最終用于涂板的菌量。
誘導時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。
為獲得需要量的蛋白，最佳誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優化。

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